一、實驗介紹
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipiation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法,這種方法常用于測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合,也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔,已成為研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法
當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時,完整細(xì)胞內(nèi)存在的很多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留下來,如果以細(xì)胞內(nèi)某種蛋白質(zhì)為抗原,加入相應(yīng)抗體,那么該抗體就能與抗原,以及與該抗原具有相互作用的蛋白質(zhì)之間形成免疫復(fù)合物,一起沉淀下來,經(jīng)過SDS-PAGE電泳,western blot 和(或)質(zhì)譜可鑒定出與抗原相互作用的蛋白質(zhì)
二、實驗週期
8-10工作日
三、交付標(biāo)準(zhǔn)
一張SDS電泳圖檔,實驗報告確認(rèn)目標(biāo)蛋白質(zhì)的色帶
四、客戶提供
細(xì)胞或組織的蛋白質(zhì)樣本
五、實驗流程
裂解細(xì)胞取上清
準(zhǔn)備抗體
準(zhǔn)備Protein A/G Beads 混合,震盪,孵育 離心收集沉澱 洗脫目的蛋白 WB檢測
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