PCR Master Mix (即用型 PCR Master Mix 含染料)
產(chǎn)品名稱:PCR Master Mix (2X) 【Ready to load】
中文別名: 即用型 PCR Master Mix 含染料
產(chǎn)品編碼:P002-5000ul
本產(chǎn)品是將 PCR 反應(yīng)所需的 Taq 酶、dNTP 混合物、MgCl2以及反應(yīng)緩沖液預(yù)先
配制成 2 倍濃度的混合物,並且含有染料(Blue Dye)。
使用時(shí)只需加入模板和引物便可進(jìn)行PCR反應(yīng),大大簡(jiǎn)化了操作過程,提高了檢測(cè)通量和結(jié)果的重現(xiàn)性。
本品含雙藍(lán)染料,反應(yīng)結(jié)束后可直接進(jìn)行電泳,使用方便。
本產(chǎn)品擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3’端帶A,可直接克隆至T載體。
·擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá) 8kb,能對(duì) 4kb及其以下長(zhǎng)度的片段進(jìn)行高效地?cái)U(kuò)增。
·含染料,染料的加入不影響PCR 反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物可直接電泳檢測(cè),節(jié)省時(shí)間。
·使用本產(chǎn)品擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物 3' 端附有一個(gè)"A"堿基, 因此可直接克隆于 T-Vector 中。
·每次使用較少時(shí),請(qǐng)將 2×Taq 酶 PCR 反應(yīng)混合液溶解后輕輕混勻分裝到 PCR 反應(yīng)管中 -20℃保存,避免反復(fù)凍融,
影響產(chǎn)品的性能及反復(fù)使用而產(chǎn)生污染。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測(cè):20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
核酸外內(nèi)酶殘留檢測(cè):20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小時(shí), DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
大腸桿菌殘留DNA檢測(cè): 50 μl體系中,以ddH2O為模板,擴(kuò)增E.coil 16s rDNA基因。35個(gè)循環(huán)后擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1% 瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,無擴(kuò)增條帶。
功能檢測(cè):50 μl體系中,以100 ng人基因組DNA為模板擴(kuò)增α-1-antitrypsin基因。30個(gè)循環(huán)后取10% PCR產(chǎn)物進(jìn)行1% 瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,觀察到單一的360 bp條帶。
穩(wěn)定性檢測(cè): PCR Master Mix 分別在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3個(gè)月、25 ºC放置1個(gè)月后,菌落PCR擴(kuò)增1.2 kb片段。電泳結(jié)果顯示2×PCR Master Mix具有非常好的穩(wěn)定性
實(shí)驗(yàn)用途:常規(guī) PCR 擴(kuò)增/鑒定;基因分型;制備TA 克隆用的PCR 產(chǎn)物。
PCR反應(yīng)性能:
以λ DNA為模板,可以很好地?cái)U(kuò)增8 kb的DNA片段。
以人基因組DNA為模板,可很好地?cái)U(kuò)增3 kb(p53基因)的DNA片段。
產(chǎn)品使用方便快捷,能避免 PCR 操作過程中的污染,使用時(shí)只需取適量2×Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,
并加入去離子水補(bǔ)足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進(jìn)行反應(yīng)。
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