Agarose LE (低電滲瓊酯醣)
產品名稱:Agarose LE
【low EEO, gel strength: ≥1000 g/cm2 (1% gel)】
中文別名:瓊酯醣(低電滲)
產品CAS :9012-36-6
產品編碼:A006L-100g
瓊脂糖,分析級,膠強度(1% gel):1000g/cm2
本公司產品優(yōu)選石花菜原料進行提取,以保證強度和透明澄清度等等,因此顏色或性狀會不同於Biowest品牌的Agarose,並非受潮或質量問題,可放心使用
凝膠配制操作步驟
1. 配制適量的制膠及電泳緩沖液(常用0.5 x TBE或1 x TAE緩沖液);
2. 根據(jù)制膠量及凝膠濃度,將準確稱量的瓊脂糖粉末加入含有一定量的電泳緩沖液玻璃三角錐形瓶中(加入電泳緩沖液體積不宜超過錐形瓶50%的容量);
3. 使用保鮮膜或PE手套套在錐形瓶口上,然后在微波爐中加熱溶解瓊脂糖(注意:當加熱時溶液沸騰后,請帶上隔溫手套,小心晃動錐形瓶,使瓊脂糖充分均勻溶解,重復此操作數(shù)次,直至瓊脂糖顆粒完全溶解;在微波爐中加熱時間不宜過長,每次當溶液開始沸騰起泡時停止加熱,否則容易引起溶液過熱暴沸外溢出來,造成凝膠濃度不精確;同時瓊脂糖溶解時,必須保證其完全徹底溶解,否則會造成電泳圖像模糊或者有亮點顆粒呈現(xiàn));
4. 待溶液冷卻至50℃左右時,可加入一定比例的核酸染料(GelRed核酸染料或其他核酸染料等)后并充分混勻;
5. 將瓊脂糖溶液倒入制膠槽中,選擇合適梳子并插入對應位置,凝膠厚度一般控制在3-5mm之間,如后續(xù)實驗需要選擇切膠回收膠條中的核酸,可適當增加凝膠厚度,如凝膠中有氣泡需將其趕出。
6. 在室溫下30 min左右凝膠即可凝固(不同濃度凝膠凝固時間不同,根據(jù)實際情況調整),拔出梳子后凝膠置于電泳槽中電泳使用,電泳緩沖液宜沒過凝膠中的加樣孔。
1.5×TBE緩沖液放置時間過久會沉淀,因此一次性不要配太多。工作用電泳緩沖液為0.5×TBE緩沖液,
取5×TBE緩沖液貯存液稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用。
2.用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須統(tǒng)一。
3.瓊脂糖粉在微波爐中加熱時間不宜過長,每次當溶液起泡沸騰時停止加熱,否則會引起溶液過熱暴沸,
造成瓊脂糖凝膠濃度不準,也會損壞微波爐。溶解瓊脂糖時,必須保證瓊脂糖充分完全溶解,否則,
會造成電泳圖像模糊不清。
4.凝膠不立即使用時,請用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存,一般可保存2-5天。
應用
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