PBS是緩沖液,緩沖液能夠維持穩(wěn)定的PH值,用來洗膜,不會破壞掉膜上蛋白質(zhì)和抗體的穩(wěn)定性及二者的免疫結(jié)合。
PBST中的T是指Tween(吐溫), 是一種非離子型去污劑,作用是在不破壞蛋白的情況下,洗脫非特異性結(jié)合的抗體。
可直接用于western blot封閉液封閉完成后,洗滌濾膜用途
PBS緩沖液即磷酸鹽緩沖液(PhosphateBuffered Saline)
它廣泛用于各種生物學研究,如細胞培養(yǎng)、免疫組化、
酶聯(lián)免疫和Western Blot等各種細胞學實驗,
包括:洗滌組織和細胞,稀釋病毒或血清,配制胰酶消化液。
選擇合適的緩沖液對于維持一定pH值下蛋白質(zhì)的穩(wěn)定及保證實驗的重復性很重要。
PBS的緩沖能力強于TBS,TBS在pH7.0以下緩沖能力較弱。
一般根據(jù)實驗?zāi)康倪x用合適的緩沖液,如在蛋白純化中進行陰離子交換層析,
陽離子緩沖液首選TBS;陽離子交換層析時,陰離子緩沖液首選PBS。
Western blot中使用PBS和TBS均可,根據(jù)需要選擇合適的濃度。